改水对氟暴露大鼠脾脏内质网应激反应的影响

摘要

目的分析改水后氟暴露大鼠脾脏内质网应激反应（endoplasmic reticulum stress,ERS）水平的变化,探讨氟致免疫系统损伤机制,并为改水降氟防治工作提供科学依据。方法选取SPF级Wistar雄性大鼠48只,按体质量（120～140 g）采用随机数字表法将其分为对照组和低、中、高氟剂量组,每组12只,各组饮用水中氟化钠（NaF）含量分别为0、50、100、150 mg/L。常规饲料喂养,自由饮水。染氟持续12周,每组选取6只大鼠分离脾脏;剩余6只大鼠改为饮用不含NaF的蒸馏水,继续饲养12周分离脾脏。采用实时荧光定量PCR（qRTPCR）检测ERS相关基因葡萄糖调节蛋白78（GRP78）、剪切型X盒结合蛋白（XBP1-s）、活化转录因子4（ATF4）、增强子结合蛋白同源蛋白（CHOP）和半胱氨酸天冬氨酸酶12（Caspase-12）的mRNA表达水平。结果改水前,对照组,低、中、高氟剂量组的GRP78（1.00±0.09、1.69±0.35、1.39±0.29、1.19±0.19）、XBP1-s（1.00±0.12、1.40±0.23、1.24±0.26、1.38±0.11）、ATF4（1.00±0.17、1.86±0.56、2.33±0.55、1.95±0.74）、CHOP（1.00±0.53、2.84±0.68、3.06±1.29、2.50±0.35）和Caspase-12（1.00±0.12、1.90±0.29、1.56±0.35、1.76±0.23）的mRNA表达组间比较,差异有统计学意义（F=8.45、5.38、6.38、8.21、11.31,P均＜0.05）,除高氟剂量组的GRP78外,其他各染氟组的上述指标均高于对照组（P均＜0.05）;改水后,对照组,低、中、高氟剂量组GRP78（1.00±0.36、0.75±0.13、0.98±0.41、0.47±0.19）、XBP1-s（1.00±0.25、0.70±0.06、0.74±0.17、0.65±0.21）、ATF4（1.00±0.51、0.66±0.09、0.91±0.34、0.81±0.29）、CHOP（1.00±0.36、0.92±0.12、0.84±0.16、0.67±0.20）和Caspase-12（1.00±0.45、0.65±0.11、0.65±0.25、0.51±0.27）的mRNA表达组间比较,差异无统计学意义（P均＞ 0.05）;低、中、高氟剂量组XBP1-s、ATF4、CHOP、Caspase-12的mRNA表达改水前后比较差异有统计学意义（P均＜0.05）,GRP78仅低氟剂量组比较差异有统计学意义（P＜0.05）。结论氟暴露可以引起大鼠脾脏的ERS反应,使ERS相关基因表达上调,改水后有所下降,ERS反应减弱;改水措施有助于氟致免疫功能损伤的恢复。