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脂溢性角化病皮损组织蛋白酶L2表达及活性对黑素小体降解的影响

         

摘要

目的检测脂溢性角化病(SK)皮损中组织蛋白酶L2(CTSL2)表达及活性, 观察SK皮损中黑素小体超微结构的变化, 研究CTSL2对黑素小体降解的影响。方法 2016年1- 8月招募武汉大学人民医院皮肤科门诊SK患者20例, 取患者皮损和周围正常皮肤组织, 其中15例用HE染色、Fontana-Masson嗜银染色观察黑素颗粒分布, 透射电镜(TEM)观察黑素小体超微结构变化, Ki67免疫组化染色检测细胞增殖状态。5例用RT-PCR和荧光底物裂解法分别检测CTSL2 mRNA表达水平及酶活性;用蔗糖梯度离心法从废弃人眼球视网膜色素上皮组织分离纯化黑素小体, 并与SK皮损表皮裂解物共孵育, TEM观察孵育后黑素小体膜结构的变化。两组间均数比较采用配对t检验, P & 0.05为差异有统计学意义。结果 SK皮损中可见大量黑素颗粒沉积, 而正常皮肤仅在基底层见线形黑素颗粒沉积。TEM观察显示, SK皮损中黑素小体破损率为24.33% ± 3.06%, 正常皮肤为49.00% ± 4.00%, 两组比较, t= 8.49, P & 0.05。RT-PCR显示, 5例SK皮损中CTSL2 mRNA相对表达水平为0.35 ± 0.09, 正常皮肤组织为0.43 ± 0.08, 两组比较, t= 3.17, P & 0.05。SK皮损中CTSL2酶活性(17.46 ± 0.45)也低于正常皮肤组织(28.78 ± 0.58), t= 34.29, P & 0.05。TEM还观察到, SK皮损裂解物处理的黑素小体破损率为32.33% ± 4.93%, 低于正常皮肤43.00% ± 2.65%, 两组比较, t= 3.30, P & 0.05。结论 SK皮损中CTSL2表达水平减低影响角质形成细胞对黑素小体的降解, 是否直接参与SK皮损的病理发生有待进一步证实。

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