咪唑安定通过上调miR-290-5p调节PI3K/AKT信号通路抑制缺氧诱导心肌细胞损伤的机制研究

摘要

目的 探讨咪唑安定(MID)对缺氧诱导心肌细胞损伤的影响和分子机制.方法 采用不同浓度的MID预处理H9C2细胞24 h,缺氧诱导后,细胞计数试剂盒(CCK-8)检测H9C2细胞存活率,确定MID最佳浓度.将H9C2细胞分为正常(NC)组、缺氧(hypoxia)组、MID+hypoxia组、miR-NC+hypoxia组、miR-290-5p+hypoxia组、anti-miR-NC+MID+hypoxia组、anti-miR-290-5p+MID+hypoxia组.CCK-8法检测细胞存活;流式细胞术检测细胞凋亡;实时荧光定量PCR(RT-qPCR)检测miR-290-5p的表达;蛋白质印记(Western blot)检测磷脂酰肌醇-3-羟激酶/蛋白激酶B(PI3K/AKT)信号通路相关蛋白的表达.结果 8、16、32μmol/L的MID预处理H9C2细胞缺氧后细胞存活率显著升高(P<0.05),16μmol/L为MID的最佳浓度.与NC组比较,hypoxia组H9C2细胞凋亡率显著升高,miR-290-5p的表达和PI3K通路活性显著降低(P<0.05).与hypoxia组比较,MID+hypoxia组H9C2细胞凋亡率显著降低,miR-290-5p的表达显著升高,PI3K通路活性显著升高(P<0.05).与MID+hypoxia组比较,miR-290-5p+hypoxia组H9C2细胞存活率显著升高,凋亡率显著降低(P<0.05).与anti-miR-NC+MID+hypoxia组比较,anti-miR-290-5p+MID+hypoxia组H9C2细胞存活率显著降低,凋亡率显著升高,PI3K通路活性显著降低(P<0.05).结论 咪唑安定通过上调miR-290-5p激活PI3K/AKT信号通路有关进而对缺氧诱导的心肌细胞损伤具有保护作用.