HIF-1α基因表达沉默对肝癌细胞的放射增敏作用

摘要

目的:探讨在乏氧条件下,HIF-1α在肝癌细胞中的表达,及HIF-1α表达沉默后对肝癌细胞的放射增敏作用.方法:利用Western bolt方法检测不同乏氧时相HIF-1α在肝癌细胞Hep3b中的表达.构建特异性的HIF-1α慢病毒干扰载体,利用慢病毒感染肝癌细胞Hep3b.杀稻瘟菌素进行药物筛选,利用RT-PCR和Western blot检测干扰效果,利用克隆形成实验观察HIF-1α表达沉默后对肝癌细胞反射敏感性的影响.结果:在乏氧条件下,肝癌Hep3b细胞HIF-1α蛋白表达增强.利用特异性的HIF-1α慢病毒沉默肝癌细胞HIF-1α的表达,Hep3b细胞中HIF-1α表达降低了90%,说明HIF-1α载体构建成功.HIF-1α表达沉默后,能明显降低放射后Hep3b细胞的克隆形成率,其放射增敏比为2.18.结论:乏氧可以诱导肝癌细胞HIF-1α的表达,HIF-1α表达沉默对肝癌细胞具有放射增敏作用.