检测人中性粒细胞防御素ELISA法的建立及初步应用

摘要

目的建立检测人中性粒细胞防御素(HNP)的ELISA法,并探讨其临床应用价值.方法以纯化的HNP-1为抗原制备特异性抗-HNP单克隆抗体,建立ELISA夹心法,同时检测36名健康献血员血浆中HNP含量,并观察血库4℃保存的全血不同保存时间血浆中HNP含量的变化.结果ELISA法批内和批间变异系数分别为4.8%和9.3%,与进口试剂比较相关性良好(r=0.98,P＜0.01),36名健康献血员血浆HNP含量为(46±48)ng/ml.库存全血随保存时间延长血浆HNP含量逐渐升高,保存25天的血浆HNP含量达到760 ng/ml.结论建立的ELISA定量检测法与进口试剂盒有良好的相关性,除血浆外,推测也能适用于细胞培养上清或各种体液中HNP的定量测定.