猪endoglin胞外段DNA疫苗诱导抗小鼠结肠癌免疫反应

摘要

背景与目的:研究表明,endoglin是肿瘤血管生成的标志性分子,用抗endoglin单克隆抗体被动免疫治疗可以有效抑制肿瘤生长,而异种DNA疫苗可以打破自身同源分子的免疫耐受。因此,本研究用猪endoglin胞外段真核表达质粒（ppEDG）作为异种DNA疫苗,了解该DNA疫苗是否具有抑制小鼠结肠癌生长的作用,并探讨其作用的免疫学机理。方法:观察免疫治疗后的荷瘤小鼠肿瘤体积和生存情况,用免疫组化方法（抗CD31）观察肿瘤组织血管生长并计算肿瘤微血管密度,用Westernblot和ELISA方法检测荷瘤小鼠免疫治疗后的血清是否含有抗自身endoglin的抗体以及抗体亚型,用ELISPOT方法检测荷瘤小鼠脾脏中分泌抗自身endoglin抗体的B淋巴细胞。结果:肿瘤接种18天后,ppEDGDNA疫苗主动免疫治疗组肿瘤体积明显小于空质粒（e-p）对照组及生理盐水对照组（P＜0.05）,存活时间明显延长（P＜0.001）。ppEDG组、e-p组和生理盐水组肿瘤组织微血管密度计数分别为19.2±4.5、76.9±14.4和81.4±16.9（P＜0.001）。治疗组小鼠血清中含有抗自身endoglin的抗体,抗体亚型主要为IgG1和IgG2b。三组小鼠分泌抗自身endoglin抗体的B淋巴细胞数分别为82.5±14.1、3.6±1.3和4.7±2.0（P＜0.001）。结论:ppEDGDNA疫苗诱导抗自身endoglin抗体产生,从而抑制肿瘤血管生成和肿瘤生长。