硝酸银和不同粒径纳米银在大鼠体内的急性毒性作用及生物分布研究

摘要

目的探讨硝酸银和2种粒径纳米银对大鼠的急性毒性作用及蓄积靶器官。方法选取36只成年SD大鼠,按照随机数字表法分为小粒径纳米银组、大粒径纳米银组、硝酸银组和对照组,每组9只。上述4组大鼠分别经尾静脉一次性注射10 mg/mL纳米银溶液（纳米银颗粒直径为20 nm,生理盐水配制）,银注射剂量为30 mg/kg;10 mg./mL纳米银溶液（纳米银颗粒直径为100 nm,生理盐水配制）,银注射剂量为30 mg/kg;1.67 mg/mL硝酸银溶液（葡萄糖溶液配制）,银注射剂量为3 mg/kg;30 mg/mL聚乙烯吡咯烷酮溶液（生理盐水配制）,注射剂量为90 mg/kg。（1）毒性实验。注射后14 d内每日行大体观察,记录注射前分别与注射后1、7、14 d的体质量差值。于注射后1、7、14 d每组各取3只大鼠,采用全自动生化分析仪检测血清中ALT、AST、总蛋白、白蛋白含量;之后立即处死大鼠,取心脏、肝脏、脾脏、肺脏、肾脏和大脑组织,计算各个脏器系数。选取脏器系数变化明显的脏器标本,每组各时相点3个样本,行HE染色观察组织病理学变化。（2）生物分布实验。选取小粒径纳米银组、大粒径纳米银组、硝酸银组大鼠的心脏、肝脏、脾脏、肺脏、肾脏标本,每组各时相点3个样本,采用电感耦合等离子体质谱仪检测各脏器银含量。对数据行析因设计方差分析、LSD检验、Dunnetts T3检验。结果（1）对照组和硝酸银组大鼠注射后大体情况无异常;2个纳米银组大鼠注射后1 d出现状态不佳、眼部有黑色分泌物等现象,注射后3 d起恢复。（2）与对照组比较,硝酸银组、大粒径纳米银组大鼠注射后14 d与注射前的体质量差值明显减少（P值均小于0.01）;小粒径纳米银组大鼠该指标则与之接近（P＞0.05）。与对照组比较,另3组大鼠注射后1、7 d与注射前的体质量差值无明显变化（P值均大于0.05）。（3）与对照组比较,注射后1 d硝酸银组大鼠血清中总蛋白含量下降、肝脏系数明显上升（P值均小于0.05）。注射后1 d,大粒径纳米银组大鼠血清中ALT含量为（61.0±8.7）U/L,明显高于对照组的（40.0±4.6）U/L,P＜0.01。与对照组的（126.0±3.5）U/L、4.05±0.23比较,注射后1 d小粒径纳米银组、大粒径纳米银组大鼠血清中AST含量明显上升[（249.7±107.2）、（237.0±38.3）U/L],肝脏系数（3.50±0.38、3.31±0.07）明显下降,P值均小于0.05。与对照组的（69.2±4.8）U/L、4.32±0.39比较,注射后7 d小粒径纳米银组、大粒径纳米银组大鼠血清中AST含量[（181.0±51.5）、（167.7±16.5）U/L]亦明显上升,肝脏系数（3.55±0.18、3.62±0.21）亦明显下降,P＜0.05或P＜0.01。与对照组比较,注射后14 d另3组大鼠血清中4项肝脏生化指标、各个脏器系数均无明显变化（P值均大于0.05）。（4）注射后1 d,硝酸银组大鼠肝脏有轻微变性;注射后7 d,小粒径纳米银组大鼠肝脏中央静脉周围肝细胞轻微变性,大粒径纳米银组大鼠肝脏肝细胞重度嗜酸性变。其余时相点各组大鼠的肝脏无明显病理改变。（5）注射后1 d,小粒径纳米银组大鼠肺脏、肾脏与大粒径纳米银组大鼠脾脏、肾脏及注射后7 d 2个纳米银组大鼠心脏、肾脏的银含量明显少于硝酸银组（P值均小于0.05）,注射后14 d小粒径纳米银组大鼠肝脏、脾脏的银含量明显多于硝酸银组（P值均小于0.05）。与硝酸银组比较,大粒径纳米银组大鼠注射后1 d肺脏及注射后7 d肝脏的银含量明显增多（P值均小于0.05）,注射后14 d各脏器银含量无明显变化（P值均大于0.05）。大粒径纳米银组大鼠注射后1 d心脏、肺脏、肾脏及注射后7 d心脏的银含量明显多于小粒径纳米银组（P值均小于0.05）,注射后14 d 2组大鼠各脏器银含量相近（P值均大于0.05）。结论硝酸银和2种粒径的纳米银对大鼠的肝脏有短暂的急性毒性作用,肝脏对这种毒性作用有一定的自愈能力。纳米银主要蓄积于肝脏,大粒径纳米银在脏器中的分布较小粒径纳米银更广。