4-香豆酰-CoA连接酶(4CL)和聚酮合酶(PKS1)的融合蛋白在莱茵衣藻中表达促进树莓酮积累

摘要

树莓酮具有重要的医药价值,如抗流感、预防糖尿病等.为了在莱茵衣藻Chlamydomonas reinhardtii中获得树莓酮,本研究将树莓酮合成的最后两个步骤中的酶,即4-香豆酰-CoA连接酶(4-coumaryl-CoA ligase,4CL)和聚酮合酶(Polyketide synthase,PKS1)通过甘氨酸-丝氨酸-甘氨酸(Gly-Ser-Gly,GSG)三肽接头融合在一起,构建莱茵衣藻表达载体pChla-4CL-PKSl.通过电转化的方法将由PSAD启动子驱动的融合基因4CL-PKS1插入野生型莱茵衣藻(CC125)和细胞壁缺失型莱茵衣藻(CC425)中.结果在表达4CL-PKS1融合蛋白的野生型莱茵衣藻和细胞壁缺失型莱茵衣藻中,树莓酮含量分别为6.7 μg/g(鲜重)和5.9μg/g(鲜重),高于天然植物中树莓酮的含量(2-4 μg/g).