家蚕浓核病毒(中国镇江株)在不同感受性宿主体内的复制

摘要

家蚕浓核病毒中国镇江株是一株双生浓核病毒(bidensovirus).其宿主感染后的病症与典型的家蚕浓核病毒(BmDNV-1伊那株)表现相似,病蚕软化,中肠的圆筒型细胞呈浓核症.该病毒的最大特点是基因组中含有二套DNA分子(VD1,VD2),这两种核酸分子以单链(+VD1,-VD1,+VD2,-VD2)线型方式被分开包装在各自的衣壳蛋白中,成为四种病毒体,而且它自身编码DNA聚合酶.有部分蚕品种对该病毒表现完全抗性,即不发病.分别对敏感性家蚕品种(华八35)和抗性家蚕品种(秋丰d)的幼虫进行经口接种病毒.在接种后,从2h到96h分9个时间点,对中肠组织进行取样.以家蚕细胞质肌动蛋白A3(actin A3)基因作为参比基因,用来标定取样组织细胞数.针对VD1和VD2分别设计特异引物,用荧光定量PCR的方法分别检测各个时间点的样品中的病毒基因组VD1和VD2拷贝数.结果表明:无论是在感性还是在抗性宿主体内,家蚕浓核病毒中国株的基因组VD1和VD2在各时间点拷贝数相近,表现出VD1和VD2是同步复制的;病毒侵入两种宿主中肠的初始量(接种后2h)基本相等,每个细胞约为6～10拷贝数.在敏感性宿主体内病毒感染过程表现为潜伏期,指数增长期,平台期.从接种后2h到12h为病毒潜伏期;12h到36h为指数增长期,倍增时间为1.71h,大约扩增15次;36h到96h为平台期,进入平台期病毒的拷贝数达到20万个.在抗性宿主体内病毒处于一种极低水平的增殖,从添毒后2h的6～10拷贝数到96h的150～200拷贝数,病毒复制倍增时间分别为3h和12h,大约扩增5次.推测家蚕对浓核病毒中国株的抗病性,只是一种慢性的带毒不发病的表现.