重组结核分枝杆菌11 kDa蛋白鉴别潜伏性结核感染与卡介苗接种的研究

摘要

目的 评价重组结核分枝杆菌11 kDa(相对分子质量为11 000)蛋白(简称“重组11kDa蛋白”)在潜伏性结核感染筛查和卡介苗接种鉴别中的应用.方法 由首都医科大学附属北京胸科医院联合北京市昌平区结核病防治所、北京市怀柔区结核病防治所和北京市大兴区结核病防治所,于2014年7月至2016年3月在以上3个区的高校和工厂招募健康志愿者.共计招募3001名志愿者,所有志愿者体检合格,均签订知情同意书.对所有志愿者采用Mantoux法进行重组11kDa蛋白和结核菌素纯蛋白衍生物(TB-PPD)同体双臂皮肤试验,分别于不同前臂皮内注射0.1ml重组11kDa蛋白(10 μg/ml)和0.1 ml TB-PPD(50 U/ml),观察注射后72 h后的皮肤反应.于皮肤试验前采集所有志愿者的静脉血,进行体外γ-干扰素释放试验(IGRA)检测.采用“一致率(％)”和“一阶一致性系数(the first-order agreement coefficient,AC1)比较重组11kDa蛋白皮肤试验、TB-PPD试验及IGRA结果的差异.3001名志愿者均接受3种方法检测,其中475名3种检测结果均为阴性的受试者,采用数字表法按随机双盲的原则,以2∶1的比例接种卡介苗(318名;失访8例)和安慰剂(147名;失访2例),接种3个月后再次进行重组11kDa蛋白皮肤试验、TB-PPD皮肤试验及IGRA,采用“一致率(％)”和“AC1”比较其结果差异.结果 健康志愿者潜伏性结核感染筛查中,IGRA阳性率(34.4％,1033/3001)明显高于重组11 kDa蛋白(32.2％,966/3001),差异有统计学意义(x2=22.787,P＜0.001);IGRA与重组11kDa蛋白的一致率为93.4％(2804/3001),AC1值为0.882(95％CI=0.866～0.898),两者有较好的一致性.TB-PPD阳性率(47.7％,1430/3001)明显高于重组11 kDa蛋白(32.2％,966/3001),差异有统计学意义(x2=182.146,P＜0.001);TB-PPD与重组11 kDa蛋白的一致率为60.6％(1819/3001),AC1值为0.243(95％CI=0.207～0.279),两者的一致性较差.卡介苗接种鉴别研究中,接种卡介苗的志愿者重组11 kDa蛋白的阳性率(1.3％,4/318)与IGRA(3.1％,10/318)比较,差异无统计学意义(x2=2.571,P=0.109);一致率为95.6％(304/318),AC1值为0.954(95％CI=0.929～0.979),两者有较好的一致性.重组11 kDa蛋白的阳性率(1.3％,4/318)低于TB-PPD(56.3％,179/318),差异有统计学意义(x2=167.350,P＜0.001);TB-PPD与重组11kDa蛋白的一致率为42.5％(135/318),AC1值为0.025(95％CI=-0.106～0.155),两者的一致性较差.接种安慰剂的志愿者重组11 kDa蛋白的阳性率(4.1％,6/147)与IGRA(1.4％,2/147)比较,差异无统计学意义(x2=2.667,P=0.109);一致率为95.9％(141/147),AC1值为0.957(95％CI=0.921～0.993),两者有较好的一致性.TB-PPD的阳性率(17.7％,26/147)高于重组11kDa蛋白(4.1％,6/147),差异有统计学意义(x2=15.385,P＜0.001),一致率为82.3％(121/147),AC1值为0.781(95％CI=0.690～0.871),两者有较好的一致性.结论 重组11 kDa蛋白在潜伏性结核感染筛查和卡介苗接种方面与IGRA有很好的一致性,可作为潜伏性结核感染者筛查与卡介苗接种鉴别的候选诊断试剂.