弗氏链霉菌泰乐菌素还原酶原核表达及结构功能研究

摘要

目的 探究弗氏链霉菌中的泰乐菌素还原酶的结构和功能.方法 通过NCBI数据库比对查找得到泰乐菌素还原酶蛋白序列及其基因序列,建立该蛋白三维模型和系统发育树,对酶蛋白进行原核表达及纯化,并测定其活性.结果 来源于弗氏链霉菌ATCC19609菌株(Streptomyces fradiae ATCC19609)的泰乐菌素还原酶基因由996bp碱基组成,编码331个氨基酸残基.该酶三级结构包括10个桶状α螺旋,8个β折叠,一个还原型烟酰胺腺嘌呤二核苷酸磷酸(NADPH)结合位点.系统发育分析表明其属于醛酮还原酶(Aldo-keto reductase,AKR)超家族的AKR12家族.酶活力测定结果表明,泰乐菌素还原酶具有宽泛的底物谱,对泰乐菌素比活力为0.128U/mg.结论 证实了弗氏链霉菌泰乐菌素还原酶可以催化还原泰乐菌素,为抑制泰乐菌素还原酶活性,提高泰乐菌素发酵产品的纯度,提供了有效的理论依据.