紫外分光光度法快速测定庆大霉素C1a含量在高通量筛选中的应用

摘要

目的 探索庆大霉素C1a含量的快速检测方法,实现诱变菌株的高通量筛选.方法 以紫外分光光度法作为检测庆大霉素C1a含量的手段,对庆大霉素C1a单组分生产菌株进行ARTP、LiCl、微波和ARTP+LiCl诱变,通过高通量筛选获得高产菌株,并在5L发酵罐中对高产稳定性菌株进行验证.结果 紫外分光光度法和高效液相色谱法对发酵液中庆大霉素C1a含量进行测定,最大相对误差为3.98％;筛选获得了10株高产菌株,其中AL324菌株与出发菌株相比,摇瓶效价提高了52％;通过稳定性传代实验,获得了4株高产稳定性菌株.5L发酵罐验证实验表明AL324与出发菌株相比效价提高了81.3％.结论 紫外分光光度法可以快速检测发酵液中庆大霉素C1a含量,该方法应用于高通量筛选中,获得了高产菌株,筛选结果表明ARTP+LiCl复合诱变方法的正突变率较高,是一种有效的庆大霉素C1a高产菌株诱变方式.