短管兔耳草多糖的结构表征及其免疫调节活性研究

摘要

本试验旨在从短管兔耳草(Lagotis brevituba Maxim)中分离纯化多糖,初步分析多糖的结构表征并研究其体外免疫调节活性.采用水提醇沉法从短管兔耳草中提取粗多糖,经DEAE-52纤维素离子交换柱进行分离纯化,得到短管兔耳草多糖(Lagotis brevituba Maxim polysaccharide,LMP).采用高效凝胶色谱法(HPGPC)、傅里叶变换-红外光谱法(FT-IR)、紫外光谱法(UV)等方法对其结构进行初步分析,并以小鼠骨髓来源树突状细胞(murine bone marrow derived dendritic cells,BMDCs)为靶细胞,采用MTT法、流式细胞术(FCM)、酶联免疫吸附试验(ELISA)等对其免疫活性进行测定.结果显示:从短管兔耳草中分离到不含核酸和蛋白质的多糖LMP,得率为(18.5±1.7)％,糖含量为(89.7±1.9％,平均分子量为3.18 ku,平均粒径为1 483.89 nm,Zeta电位为-14.81 mV.扫描电镜(SEM)和原子力显微镜(AFM)结果显示,LMP的表面光滑,呈片状分布,单链的高度在5.4 nm左右.3.13～50.00μg·mL-1 LMP 能显著促进 BMDCs 增殖(P＜0.05)及其表面分子(CD80、CD86、MHC-1和MHC-Ⅱ)的表达(P＜0.05)和细胞因子(TNF-α、IL-12)的分泌(P＜0.05),同时显著降低BMDCs的吞噬能力(P＜0.05).LMP能促进BMDCs表型和功能的成熟,具有较好的免疫调节活性,可将其作为潜在的免疫调节剂.