急性热应激对山羊血液生化指标及血淋巴细胞热休克蛋白70家族基因表达的影响

摘要

旨在研究急性热应激对山羊抗氧化能力、免疫功能和血淋巴细胞热休克蛋白70(HSP70)家族基因表达的影响.本试验选取5只健康、体况接近的(12±0.5)月龄波尔山羊×关中奶山羊杂交F1母羊,饲养于环控舱内(温度维持20℃,相对湿度60％),适应5d.第6天利用环控舱对5只试验羊进行38℃急性热应激处理12h,采集热应激前(0 h,20℃)和热应激后2、4、8和12 h试验羊血样.分别利用比色法测定血清抗氧化指标(总抗氧化能力、超氧化物歧化酶、谷胱甘肽过氧化物酶活性和丙二醛含量),ELISA法测定血清免疫指标(免疫球蛋白和细胞因子含量),实时荧光定量PCR法测定血淋巴细胞HSP70家族基因(HSPA1A、HSPA6和HSPA8)mRNA的表达量.结果 显示:1)热应激时间对血清抗氧化指标有显著影响.与热应激前0h相比,血清T-AOC(P＜0.05)、SOD(P＜0.05)和GSH-Px(P＜0.01)活性均在热应激8h后显著下降,MDA含量在热应激4h后显著增加(P＜0.05).2)热应激时间对血清免疫指标有显著影响.与热应激前0h相比,血清TNF-α、IL-1β、IFN-γ和IL-2含量分别在热应激4、8、8和4h后显著增加(P＜0.05);IL-4(P＜0.01)、IgG(P＜0.01)、IgM(P＜0.01)和IgA(P＜0.05)含量分别在热应激12、4、4和4h后显著下降.3)热应激时间显著提高血淋巴细胞中HSP70家族基因(HSPA1A、HSPA6和HSPA8)的表达量.HSPA1A mRNA表达量呈先升高后下降的趋势,在热应激4h时达到峰值,各检测时间点均显著高于应激前水平(P＜0.01);HSPA6 mRNA表达量在热应激2h时显著升高(P＜0.01),4h后恢复到应激前水平(P＞0.05);HSPA8 mRNA表达量在热应激4(P＜0.05)、8(P＜0.01)、12 h(P＜0.01)时显著高于应激前水平.在本试验条件下,38℃急性热应激能够抑制山羊的免疫和抗氧化功能;提高血淋巴细胞HSPA1A、HSPA6和HSPA8基因的表达量,其中HSPA1A对热应激温度和时间更敏感,可作为山羊热应激早期的分子标志物.