嵌合型猪圆环病毒(PCV1-2)灭活苗对商品猪免疫保护效力的研究

摘要

运用多功能细胞电穿孔仪将本实验室构建的重组pSK-dPCV1-2质粒转染Dulac细胞,传代培养后获得具有稳定感染细胞的重组嵌合型猪圆环病毒PCV1-2.将该重组病毒灭活后与ISA 206 VG佐剂乳化制成灭活苗,通过免疫效力试验来评价该疫苗的免疫保护效力.将42日龄PCV2母源抗体水平较低的20头商品猪随机分成4组,另外2头作为健康对照组.分2次免疫,通过检测不同时间的间接免疫荧光抗体滴度、中和抗体滴度、平均日增重、攻毒后病毒血症以及解剖后病理变化和组织中的病毒载量等各项指标评价疫苗的免疫保护效果.结果显示:二免后14d,所有免疫组试验猪都表现为PCV2血清学阳性,且中和抗体水平在1/15～1/20.在猪的增重方面,免疫组猪和健康对照组猪的体重都有增加,而攻毒对照组猪的体重没有增加,且3个免疫组和攻毒对照组之间平均日增重差异显著(P＜0.05).攻毒后21d扑杀试验猪,免疫组猪的淋巴结和各脏器的大体和显微病变都比攻毒对照组轻微.攻毒对照组的淋巴结出现多核巨细胞和嗜酸性粒细胞,且有多量的淋巴细胞缺失,免疫组未见多核巨细胞,淋巴细胞缺失也较少.淋巴结中PCV2病毒载量的log10在攻毒对照组为5.566±0.432,在104.0、105.0、106.0 TCID50·mL-1免疫组分别为4.469±1.023、4.434±0.716、3.521±0.958,其中1050、105.0 TCID50·mL-1免疫组与攻毒对照组差异显著(P＜0.05),但是,试验期间各试验组和健康对照组均未观察到明显的类似PMWS的临床症状.断奶仔猪免疫105.0 TCID50·mL-1以上嵌合型猪圆环病毒PCV1-2灭活苗可以有效地抵抗PCV2b/1B/Jiangsu/Jingjiang/2012/11/08病毒感染.