鹅乙酰辅酶A酰基转移酶2基因的克隆及其在鹅肥肝形成过程中的表达变化

摘要

为了探讨ACAA2基因与鹅(Anser anser)肝脂肪代谢的关系,本试验选取35只朗德鹅分为填饲组(15只)和对照组(20只),填饲组包括填饲7、14和19天3个阶段.运用RT-PCR方法克隆出朗德鹅ACAA2基因的完整编码序列并进行生物信息学分析,采用实时定量PCR技术测定了朗德鹅填饲不同阶段该基因在肝中的表达水平,并用葡萄糖、脂肪酸和胰岛素分别处理鹅原代肝细胞,观察这些因子对基因表达的影响.朗德鹅ACAA2基因完整CDS区长1 194 bp,编码397个氨基酸;各阶段填饲组肝中该基因的表达量显著高于对照组(P＜0.05),但随填饲时间的延长,表达水平呈下降趋势.另外,在培养的鹅原代肝细胞中,相较于对照组,0.5 mmol·L-1的油酸能使ACAA2的表达量显著上调,而0.25 mmol·L-1的棕榈酸和不同浓度的胰岛素能显著下调ACAA2的表达(P＜0.05).结果表明,ACAA2基因的表达与鹅肥肝的形成密切相关,为深入研究ACAA2基因在鹅肥肝形成过程中的作用奠定了基础.