海马ApoE在年龄因素影响多次七氟烷麻醉小鼠远期认知功能中的作用：基因敲除法

摘要

目的 采用基因敲除法评价海马载脂蛋白E（ApoE）在年龄因素影响多次七氟烷麻醉小鼠远期认知功能中的作用。方法 幼年（6日龄）及成年（60日龄）雌性野生型（WT）C57BL/6J小鼠72只、ApoE基因敲除型（ApoE-KO）C57BL/6J小鼠56只,幼年小鼠体重3～5 g,成年小鼠体重20～25 g。采用随机数字表法将WT小鼠和ApoE-KO小鼠分别分为4组（WT小鼠每组18只,ApoE-KO小鼠每组14只）：幼年对照组（P6＋C组）、幼年七氟烷组（P6＋S组）、成年对照组（P60＋C组）及成年七氟烷组（P60＋S组）。七氟烷组每天吸入3%七氟烷及60% O2 2 h,连续3 d,对照组则置于相同环境,每天吸入60% O2 2 h,连续3 d。于七氟烷麻醉结束当天（出生后8或62 d）每组随机选取4只小鼠,采用ELISA法检测海马IL-1β、IL-6和TNF-α含量；WT小鼠各组随机取4只,采用Western blot法检测海马完整长度ApoE和ApoE碎片段的表达水平；每组随机取10只小鼠进行标准化饲养,于七氟烷麻醉后22 d（出生后30或84 d）进行条件恐惧实验。结果 WT小鼠：与P6＋C组比较,P6＋S组海马TNF-α、IL-6和IL-1β含量升高,完整长度ApoE和ApoE碎片段表达上调,僵直时间缩短（P＆0.05）,P60＋C组与P60＋S组上述指标比较差异无统计学意义（P＆0.05）；ApoE-KO小鼠：P6＋C组与P6＋S组比较、P60＋C组与P60＋S组比较海马TNF-α、IL-6、IL-1β含量和僵直时间差异无统计学意义（P＆0.05）。结论 年龄因素影响多次七氟烷麻醉小鼠远期认知功能障碍的机制与上调海马ApoE表达,诱发神经炎性反应有关。