α2A肾上腺素能受体在右美托咪定抑制Ⅱ型肺泡上皮细胞缺氧复氧损伤时TLR4/NF-κB信号通路激活中的作用

摘要

目的 评价α2A肾上腺素能受体（α2AAR）在右美托咪定抑制Ⅱ型肺泡上皮细胞缺氧复氧损伤时Toll样受体4（TLR4）/NF-κB信号通路激活中的作用。方法 体外培养大鼠Ⅱ型肺泡上皮细胞RLE-6TN,采用随机数字表法分为4组（n＝6）：对照组（C组）、缺氧复氧损伤组（H/R组）、右美托咪定组（D组）和α2AAR小干扰RNA（siRNA）＋右美托咪定组（α2AAR-siRNA＋D组）。采用缺氧24 h复氧4 h的方法制备缺氧复氧损伤模型。D组给予终浓度为1 nmol/L的右美托咪定孵育1 h,然后制备缺氧复氧损伤模型；α2AAR-siRNA＋D组用50 nmol/L α2AAR-siRNA转染细胞,48 h后给予终浓度为1 nmol/L的右美托咪定孵育1 h,然后制备缺氧复氧损伤模型。采用CCK-8法测定细胞活力,采用流式细胞术测定细胞凋亡率,采用免疫荧光法检测TLR4和NF-κB的表达水平。结果 与C组相比,H/R组细胞活力降低,细胞凋亡率升高,TLR4和NF-κB表达上调（P＆0.05）,D组上述指标差异无统计学意义（P＆0.05）；与H/R组相比,D组细胞活力升高,细胞凋亡率降低,TLR4和NF-κB表达下调（P＆0.05）,α2AAR-siRNA＋D组上述指标差异无统计学意义（P＆0.05）；与D组比较,α2AAR-siRNA＋D组细胞活力降低,细胞凋亡率升高,TLR4和NF-κB表达上调（P＆0.05）。结论 右美托咪定抑制Ⅱ型肺泡上皮细胞缺氧复氧损伤时TLR4/NF-κB信号通路激活的机制与激动α2AAR有关。