自噬对脓毒症小鼠急性肺损伤的内源性保护作用与炎性反应的关系

摘要

目的评价自噬对脓毒症小鼠急性肺损伤的内源性保护作用与炎性反应的关系。方法清洁级雄性C57BL/6小鼠130只,6周龄,体重20~25 g,采用随机数字表法分为5组（n=26）:假手术组（S组）、脓毒症组（Sep组）、自噬诱导剂雷帕霉素组（Rap组）、自噬抑制剂3-甲基腺嘌呤组（3-MA组）和溶酶体抑制剂巴弗洛霉素组（Baf组）。采用盲肠结扎穿孔法制备小鼠脓毒症模型。Rap组、3-MA组和Baf组分别于术后1 h腹腔注射雷帕霉素10 mg/kg、3-甲基腺嘌呤15 mg/kg、巴弗洛霉素1 mg/kg。每组随机取20只小鼠,术后7 d观察生存情况,计算7 d生存率。每组取6只小鼠,于术后24 h时心脏穿刺取血后,取肺组织,采用ELISA法测定血清和肺组织TNF-α、高迁移率族蛋白1（HMGB1）、IL-6、IL-10及单核细胞趋化蛋白-1（MCP-1）的水平,采用Western blot法测定肺组织自噬蛋白微管相关蛋白1轻链3Ⅱ型（LC3Ⅱ）、Beclin-1、溶酶体相关膜蛋白2（LAMP2）以及Ras基因相关蛋白7（Rab7）的表达。结果与S组比较,Sep组7 d生存率降低,血清和肺组织TNF-α、HMGB1、IL-6、IL-10、MCP-1及肺组织LC3Ⅱ、Beclin-1、LAMP2、Rab7的水平升高（P＜0.05）;与Sep组比较,Rap组7 d生存率、血清和肺组织IL-10、LAMP2、Rab7的水平升高,3-MA组和Baf组降低,Rap组血清和肺组织TNF-α、HMGB1、IL-6、MCP-1水平降低,3-MA组和Baf组升高,Rap组和Baf组肺组织LC3Ⅱ、Beclin-1水平升高,3-MA组降低（P＜0.05）。结论自噬对脓毒症小鼠急性肺损伤产生内源性保护作用与抑制炎性反应有关。