核酸适配体功能化磁珠在转移性大肠癌细胞富集中的应用

摘要

基于核酸适配体对转移性肿瘤细胞高亲和力和高特异性的靶向识别功能,采用生物素-链霉亲和素的交联方法,将核酸适配体W3修饰在磁珠微球上,形成特异性识别转移性大肠癌细胞的功能化磁珠（W3-beads）,实现对转移性大肠癌细胞的靶向捕获和富集。核酸适配体W3在室温条件和人血浆环境下可保持对靶细胞的特异性结合能力,制备的修饰磁珠W3-beads可在不同比例的靶细胞/非靶细胞混合细胞中有效捕获靶细胞。W3-beads对不同靶细胞数进行捕获时,在细胞数量超过10~3 cell/mL时捕获效率超过75%,实际检出限达到50 cell/mL;初始细胞数量与捕获细胞数量之间的校准公式为y=0.7253x-5.1199 （R~2=0.9967）。将靶细胞掺入全血中模拟循环肿瘤细胞,W3-beads可对全血中靶细胞实现有效地捕获和富集。本研究构建的W3-beads对转移性大肠癌细胞具有良好的靶向捕获、分离和富集能力,可为大肠癌患者血样中循环肿瘤细胞的富集提供有效简便的工具。