黄花蒿花粉新过敏原烯醇化酶鉴定:重组纯化及IgE结合活性

摘要

目的 分析并鉴定黄花蒿花粉中新过敏原烯醇化酶以及致敏性.方法 通过对黄花蒿花粉转录组学研究,得到潜在过敏原烯醇化酶的基因序列,通过序列扩增、重组表达和纯化获得重组黄花蒿花粉烯醇化酶,结合过敏患者血清和酶联免疫吸附实验(ELISA)、免疫印迹实验(Western blot)和竞争抑制实验研究黄花蒿花粉烯醇化酶的IgE结合活性.结果 38份蒿属过敏患者血清ELISA结果显示黄花蒿花粉烯醇化酶的IgE结合率为24％(9/38),其中5份在免疫印迹分析中显示阳性结合条带.竞争抑制结合分析显示重组黄花蒿花粉烯醇化酶能够抑制过敏患者血清中IgE与黄花蒿花粉总提取物的结合.结论 从黄花蒿花粉中分析并鉴定出一种新的过敏原烯醇化酶,进一步丰富了蒿属物种的致敏组分信息,为蒿属花粉过敏疾病的组分解析诊断方法的建立奠定基础.