α-1,3-岩藻糖基转移酶IV在肝癌转移中的表达及机制研究

摘要

目的 探讨α-1,3-岩藻糖基转移酶IV在肝癌转移中的表达及机制.方法 通过qRT-PCR检测不同转移潜能肝癌细胞中α-1,3-岩藻糖基转移酶IV(FUT4)的表达水平;利用转化生长因子-β1(Transforming growth factor-β1,TGF-β1)诱导人肝癌M HCC97L细胞构建上皮间质转化(Epithelial-mesenchymal transition,EM T)模型,显微镜下观察细胞形态变化,qRT-PCR及Western blot检测EMT标志分子表达水平,qRT-PCR检测FUT4的表达水平;借助HCMDB数据库获取转移与非转移肝癌样本中FU T4的表达水平及共表达基因,并通过OmicsBean数据库对FU T4及其共表达基因进行KEGG通路富集分析.结果 与低转移潜能人肝癌M HCC97L细胞相比,在高转移潜能人肝癌细胞M HCC97H与HCCLM3中FUT4的mRNA表达水平均显著提高(P<0.01),分别为MHCC97L细胞中的4.99倍和6.08倍;经TGF-β1诱导的人肝癌MHCC97L细胞呈纺锤形,E-钙黏蛋白的mRNA表达水平显著降低(P<0.001),N-钙黏蛋白、波形蛋白的mRNA表达水平显著提高(P<0.001),蛋白表达变化与mRNA表达变化一致,EMT模型构建成功,且FUT4的mRNA表达水平在该模型中显著提高(P<0.01),为对照组的1.42倍;生物信息学分析结果进一步证实,与非转移肝癌样本相比,转移肝癌样本中FUT4的表达水平显著提高(P<0.01),并且提示FUT4及共表达基因可能通过肿瘤转录调控异常、肌动蛋白细胞骨架调节、ECM受体相互作用等KEGG通路参与肝癌转移过程.结论 FUT4高表达与肝癌细胞EMT及转移密切相关,为肝癌转移的诊断和治疗提供了以FU T4为潜在生物学标志物与靶点的新思路.