经肝静脉与门静脉离体灌注分离猪肝细胞的比较研究

摘要

目的比较经门静脉顺行灌注法与肝静脉逆行灌注法离体分离屠宰场猪肝细胞并观察原代培养的肝细胞形态学变化.方法经门静脉顺行和肝静脉逆行离体胶原酶灌注法分离猪肝细胞,并在含10%小牛血清的Williams E培养基中培养.结果顺行灌注与逆行灌注法分离猪肝细胞的平均产量分别为(8.8±0.5)×109/肝与(1.5±0.1)×1010/肝(P＜0.05),平均肝细胞活性为(88.7±1.5)%与(90.3±1.5)%(P＞0.05).分离后的肝细胞增生活跃,生长良好,未见污染.结论采用肝静脉逆行灌注法可以分离获得高产率、高活性肝细胞,可以为生物人工肝提供可靠的细胞来源.