微小RNA⁃708靶向调控FOXO3表达及对非小细胞肺癌细胞增殖、侵袭和迁移的影响

摘要

cqvip:目的探讨微小RNA-708(miR-708)对叉头转录因子O亚型3(FOXO3)表达的靶向调控作用及对非小细胞肺癌(NSCLC)细胞增殖、侵袭和迁移的影响。方法采用脂质体法向NSCLC细胞A549转染miR-708抑制剂(Inhibitor组)和阴性对照(NC组),并设空白对照组。采用实时定量PCR(QPCR)检测miR-708水平以评估转染效率,分别采用MTT法、细胞划痕实验和侵袭实验检测A549细胞的增殖、迁移和侵袭能力,双荧光素酶报告基因实验验证miR-708对FOXO3的靶向关系,采用QPCR检测FOXO3 mRNA水平。结果Inhibitor组的miR-708水平为0.241±0.057,低于空白对照组的1.027±0.121和NC组的1.186±0.254(P<0.05);与空白对照组和NC组相比,Inhibitor组转染后24~48 h时的细胞增殖活力降低(P<0.05);Inhibitor组的划痕愈合率和穿膜细胞数分别为(33.24±1.98)%和(202.9±8.4)个,均低于空白对照组的(54.23±2.16)%和(352.7±12.5)个及NC组的(55.63±2.78)%和(361.2±13.7)个,差异有统计学意义(P<0.05)。双荧光素酶报告基因实验显示,miR-708模拟物可抑制野生型FOXO3 3’端非翻译区的荧光素酶活性,而不影响突变型。QPCR结果显示,Inhibitor组的FOXO3 mRNA水平高于空白对照组和NC组(P<0.05)。结论下调miR-708水平可抑制A549细胞的增殖、迁移和侵袭能力,可能通过靶向FOXO3来发挥促癌作用,有望成为NSCLC防治的潜在靶点。