钙网蛋白与卵清白蛋白融合蛋白的纯化及其生物学功能

摘要

为原核表达纯化钙网蛋白（calreticulin,CRT）分子与模型抗原鸡卵清白蛋白（ovalbumin,OVA）片段的融合蛋白,并初步探究其生物学活性。现通过重叠PCR方法人工构建CRT-peptide复合物OVA161-276-CRT39-272载体,在基因工程菌中诱导表达后,通过Ni 2＋亲和层析的方法纯化出目的蛋白,并考察融合蛋白对树突状细胞功能的影响,初步探究其生物功能。结果显示,正确构建好载体且所纯化融合蛋白纯度超过95%,融合蛋白相对于作为对照的OVA片段能促进树突状细胞的成熟和细胞因子的释放。OVA161-276-CRT39-272融合蛋白具有一定的生物学活性,为下一步探究奠定基础。