以氧化三甲胺作为细胞冻存保护剂的研究

摘要

为了开发1种新型高效无毒的超低温冻存保护剂,解决当前保护剂存在细胞毒性等瓶颈问题,以天然渗透压调节剂氧化三甲胺（TMAO）作为超低温冻存保护剂,采用超速冷冻方法对2种模型细胞—人肺癌细胞（GLC-82）、人宫颈癌细胞（Hela）进行超低温保存。对不同浓度TMAO水溶液进行差示扫描量热测试（DSC）,结果表明,TMAO可以显著降低水溶液的冰点,抑制冰晶生成,有利于保护细胞免受冰晶损伤;细胞毒性测试结果表明,细胞在添加质量浓度为0.01kg/L TMAO的细胞培养液中浸泡3d后,未观察到细胞受到毒性损伤;细胞冻存测试结果表明,当培养基中TMAO的质量浓度为0.06kg/L时,冻存效果最优,GLC-82细胞与Hela细胞的复苏成活率分别达到64%和41%;细胞冻存优化试验结果表明,在0.06kg/L TMAO冻存保护液中加入质量浓度为0.02kg/L的海藻糖后,细胞复苏成活率提高了20%。