怀牛膝饮片的质量标准及指纹图谱研究

摘要

目的:建立怀牛膝饮片的质量评价标准并建立不同产地饮片的指纹图谱.方法:采用薄层色谱法(TLC)鉴别怀牛膝饮片;按2015年版《中国药典》(四部)方法检查怀牛膝饮片的水分、总灰分、醇溶性浸出物的含量;采用紫外分光光度法测定总甾酮的含量;采用高效液相色谱法(HPLC)测定β-蜕皮甾酮的含量;采用HPLC法建立10批怀牛膝饮片的指纹图谱,以β-蜕皮甾酮(10号峰)为参照,采用《中药色谱指纹图谱相似度评价系统(2012版)》进行相似度评价,确定共有峰;采用SPSS 21.0软件进行聚类分析、主成分分析以评价怀牛膝饮片的综合质量.结果:TLC鉴别结果显示,在供试品色谱中,与β-蜕皮甾酮、人参皂苷Ro对照品色谱相应位置上有相同颜色的斑点.10批怀牛膝饮片的平均水分含量为4.07％～6.33％,总灰分含量为5.04％～6.43％,醇溶性浸出物含量为6.57％～11.12％.总甾酮(以β-蜕皮甾酮计)、β-蜕皮甾酮检测质量浓度的线性范围分别为0.01～0.08、68.5～479.5μg/mL(R2均大于0.999),精密度、稳定性、重复性试验的RSD均小于3％,平均加样回收率分别为98.85％(RSD=1.89％,n=6)、100.34％(RSD=2.12％,n=9),平均含量分别为0.34％～0.56％、0.07％～0.09％.10批怀牛膝饮片共有24个共有峰,相似度均大于0.900.聚类分析结果显示,10批怀牛膝饮片可聚为4类,其中S1、S3、S6、S10为一类,S2、S7、S8为一类,S4、S9为一类,S5为一类.主成分分析结果显示,前4个主成分因子的累积方差贡献率为86.774％.综合质量高低依次为S8>S5>S9>S4>S3>S7>S6>S10>S2>S1.结论:所建质量标准、含量测定方法和HPLC指纹图谱稳定、准确性好,可用于全面评价怀牛膝饮片的质量.