低氧环境下PLGA/胶原纤维支架对小鼠骨髓间充质干细胞增殖及成肌腱分化影响

摘要

目的 探讨低氧环境下PLGA/胶原纤维支架对小鼠骨髓间充质干细胞(mBMSCs)增殖及成肌腱分化的影响.方法 利用静电纺丝技术制作出30组PLGA/胶原纤维支架,正常条件下培养的mBMSCs为正常对照组;以3％O2,5％CO2,92％N2建立细胞低氧模型,在低氧环境下培养mBMSCs为低氧对照组,mBMSCs种植在PLGA/胶原纤维支架为低氧支架实验组,各组均进行成肌腱分化诱导实验14 d.CCK-8实验检测3 d、5 d、7 d各组mBMSCs增殖的吸光度值,ELISA实验检测各组mBMSCs上清液肌腱细胞标志性蛋白Tenomodulin和Scleraxis含量.结果 在3 d、5 d、7 d观察点内,正常对照组、低氧对照组、低氧支架实验组mBMSCs吸光度值差异有统计学意义(P<0.05),第3 d、5 d、7 d观察点内,低氧对照组mBMSCs吸光度值均高于正常对照组,差异有统计学意义(P<0.01);与低氧对照组相比,低氧支架实验组3 d、5 d、7 d吸光度A值均分别增高,差异有统计学意义(P<0.01).在细胞低氧环境下,低氧支架实验组Tenomodulin蛋白(4.526±0.002)μmol/L和Scleraxis蛋白(3.752±0.004)μmol/L含量高于低氧对照组Tenomodulin蛋白(2.831±0.023)μmol/L和Scleraxis蛋白(2.457±0.032)μmol/L,低氧对照组Tenomodulin蛋白(2.831±0.023)μmol/L和Scleraxis蛋白(2.457±0.032)μmol/L含量高于正常对照组Tenomodulin蛋白(1.542±0.071)μmol/L和Scleraxis蛋白(1.136±0.056)μmol/L,3组对比差异有统计学意义(P<0.01).结论 低氧环境下PLGA/胶原纤维支架可有效促进mBMSCs增殖和成肌腱分化.