三氯生对斑马鱼发育和脂质代谢的影响

摘要

通过TCS(三氯生)亚致死剂量急性暴露斑马鱼胚胎至幼鱼,探究其对斑马鱼胚胎发育和脂质代谢的影响.结果表明,在体视显微镜下统计发现TCS在200μg/L浓度急性暴露延迟了72hpf胚胎的孵化,孵化率下降13.24%,而畸形率提高80%以上.120hpf(受精后小时)幼鱼畸形表现为能量淤积、卵黄囊肿、吸收障碍而后延,游囊闭合,心包囊肿,脊椎弯曲,少数个体小眼畸形.利用Metascape在线数据库进行TCS作用靶的预测和分析,并对药靶分子GO(基因本体)功能聚类和KEGG(京都基因与基因组百科全书)代谢途径分析,多数基因在分子功能、生物过程和细胞组成上参与羧酸代谢、类固醇激素受体活性、脂质绑定、脂质分解与代谢过程、脂质稳态、脂质定位的调控等生物学功能,有3条KEGG信号通路与脂质代谢有直接或间接的关系.通过ELISA试剂盒和Thermo全波段酶标仪对幼鱼(120hpf)生化指标的检测发现,总胆固醇(T-CHO)与甘油三脂(TG)浓度显著升高.利用油红O染料进行脂质染色发现幼鱼肝脏、卵黄、血管有脂滴堆积现象,尤其集中于肝脏和卵黄中.脂质代谢和能量供应与运动行为密切相关,借助Noldus行为分析仪进行行为学测试,表明TCS暴露后斑马鱼自主运动活力抑制,对声光刺激敏感程度显著下降.上述现象均可被100μg/L的脱氧胆酸钠供给而减轻.预示TCS低剂量环境暴露通过影响肝胆循环诱导斑马鱼脂质代谢紊乱,造成能量供应障碍.