体积排阻色谱法测定牛奶、乳粉、乳清粉中α-乳白蛋白的含量

摘要

建立了体积排阻色谱法检测牛奶、乳粉、乳清粉中α-乳白蛋白含量的分析方法。使样品中的α-乳白蛋白经过盐酸胍变性以及2-巯基乙醇还原后,形成展开的α-乳白蛋白的单体结构,调节pH至6.5~7.5,串联使用两根体积排阻色谱柱MAbPac SEC-1300A(7.8 mm×300 mm),盐酸胍为流动相,等梯度洗脱,用光电二极管阵列检测器在280 nm进行检测。本方法可以同时适用于牛奶、乳粉以及乳清粉中α-乳白蛋白的分离分析。α-乳白蛋白的线性范围为10~500 mg/L,线性相关系数均大于0.99。α-乳白蛋白的检出浓度为3.00μg/mL(S/N=3),定量浓度为10.0 g/mL(S/N=10)。牛奶、乳粉-乳白蛋白含量的分析方法。样1品中的α-乳白蛋白经过盐酸胍变性以及2-巯基乙醇还原后,形成展开的α-乳白蛋白的单体结构,调节pH至6.5~7.5,串联使用两根体积排阻色谱柱MAbPac SEC-1300A(7.8 mm×300 mm),盐酸胍为流动相,等梯度洗脱,用光电二极管阵列检测器在280 nm进行检测。本方法可以同时适用于牛奶、乳粉以及乳清粉中α-乳白蛋白的分离分析。α-乳白蛋白的线性范围为10~500 mg/L,线性相关系和乳清粉中α-乳白蛋白低中高3种浓度的加标平均回收率分别为90.9%~98.2%、100.0%~101.4%和95.1%~100.4%,6次重复性实验的相对标准偏差(relative standard deviation,RSD)均小于10%。该方法简便、准确、灵敏,适合测定牛奶、乳粉和乳清粉中α-乳白蛋白的含量。