富硒乳酸菌对黄曲霉毒素B1诱导鸡小肠上皮细胞凋亡的影响

摘要

试验旨在探究富硒乳酸菌对黄曲霉毒素B1(AFB1)对鸡小肠上皮细胞(CSIEC)凋亡的影响.将体外培养的CSIEC细胞分为对照组(C)、AFB1(300 μmol/L AFB1)、AFB1 +0.01 Se(300μmol/L AFB1 +0.01 μmol/L富硒乳酸菌,以Se计)、AFB1+0.05 Se和AFB1 +0.1 Se组,待细胞长至60％～70％汇合时,AFB1+ 0.01 Se、AFB1+0.05 Se和AFB1 +0.1 Se组培养液更换为含对应Se浓度的培养液,对照组和AFB1组更换为正常培养液,8h后向含AFB1组加入300 μmol/L AFB1,继续培养24 h.用CCK-8法检测细胞存活率,ELISA法检测培养液中乳酸脱氢酶(LDH)的活性,TUNEL法检测细胞凋亡率,Western blotting检测线粒体通路和内质网通路相关蛋白Bcl-2、Bax、PERK、ATF4、CHOP、GRP78、p53和p21的表达.细胞存活率检测结果表明,与对照组相比,其余各组CSIEC存活率均极显著降低(P＜0.01);与AFB1组相比,加硒各组存活率均极显著升高(P＜0.01).LDH活性检测结果表明,与对照组相比,其余各组LDH活性均极显著升高(P＜0.01);与AFB1组相比,加硒各组LDH活性均极显著降低(P＜0.01).细胞凋亡率检测结果表明,与对照组相比,AFB1组TUNEL阳性细胞数极显著升高(P＜0.01),且与加硒各组差异均不显著(P＞0.05).Bcl-2/Bax表达量检测结果表明,与对照组相比,AFB1组Bcl-2/Bax极显著降低(P＜0.01),AFB1 +0.05 Se组显著升高(P＜0.05).内质网应激通路相关蛋白表达量检测结果表明,与对照组相比,AFB1组PERK、CHOP、GRP78和p53的表达量均极显著升高(P＜0.01);与AFB1组相比,加硒各组PERK、GRP78表达量均极显著降低(P＜0.01),AFB1 +0.05 Se和AFB1 +0.1 Se组CHOP和p53的表达量均极显著或显著降低(P＜0.01;P＜0.05).因此,富硒乳酸菌能够缓解AFB1诱导的CSIEC凋亡.