三味清热类中药水提物对肉仔鸡肠道菌群和黏膜屏障功能的影响

摘要

为了研究单味中药对肠道菌群和肠黏膜损伤的调节和修复作用,选用金银花、连翘和紫花地丁三味清热类中药对大肠杆菌所致肉仔鸡肠道菌群失调和黏膜屏障功能障碍进行治疗,为单味中药在提高肠道细菌的有益菌群和保护肠黏膜屏障提供可靠的理论依据.选取100只1日龄雄性肉仔鸡,分成5组,每组20只,空白组正常饲喂,模型组和中药组于15～17 d腹腔注射大肠杆菌O78(1.0×106 CFU/mL),1 mL/只.中药组在第18天开始饮用中药,连续7 d,各中药组动物给药量为生药量1 g/kg.在给药后第7和14天,每组取6只鸡心脏釆血,采用ELISA法按照试剂盒说明进行D-乳酸(D-LA)、二胺氧化酶(DAO)和内毒素(ET)的检测.采集空肠肠段和盲肠.采用实时荧光定量PCR检测空肠紧密连接蛋白((闭合小环蛋白-1(ZO-1)、闭锁蛋白(Occludin)和闭合蛋白-1(Claudin-1))的mRNA的相对表达量.盲肠送检测公司检测中药对盲肠菌群多样性的影响.试验结果表明,金银花、紫花地丁和连翘均可以降低给药后第7和14天肉仔鸡血清(DAO活性)、D-LA和ET含量.在给药后第7天,金银花组ZO-1和Occludin的mRNA相对表达量显著升高(P<0.05);连翘组Claudin-1和Occludin的mRNA相对表达量显著升高(P<0.05);在给药后第14天,金银花组ZO-1的mRNA相对表达量显著升高(P<0.05),紫花地丁组ZO-1和Claudin-1的mRNA相对表达量显著升高(P<0.05),连翘组ZO-1、Claudin-1的mRNA相对表达量显著升高(P<0.05).金银花、紫花地丁和连翘均可提高给药后第7天厚壁菌门占比(P<0.05),金银花、紫花地丁可提高给药后第14天拟杆菌门占比(P<0.05),金银花、紫花地丁抑制给药后第7和14天变形菌门的增殖,紫花地丁和连翘抑制给药后第7天放线菌门的生长(P<0.05),连翘、金银花可以显著提高给药后7和14 d乳酸杆菌占比,紫花地丁可以显著提高给药后7 d乳酸杆菌占比(P<0.05),紫花地丁显著提高给药后第14天未分类毛螺旋菌种相关菌属的占比.综上,金银花、紫花地丁和连翘均可以降低肉仔鸡血清DAO活性、D-LA和ET含量,减少毒素入侵.金银花可以提高ZO-1、Occludin的mRNA相对表达量,连翘可提高ZO-1、Claudin-1和Occludin的mRNA相对表达量,保护肠道黏膜;紫花地丁可提高ZO-1、Claudin-1的mRNA相对表达量.金银花、紫花地丁和连翘均可使肠道OTU数目增多,在不同程度上促进有益菌群繁殖,抑制致病菌群生长,具有调节肠道菌群结构的作用.