牛奶中替米考星间接竞争酶联免疫吸附检测法的建立

摘要

本研究通过棋盘法优化替米考星抗体、包被原浓度,并考察了最佳包被条件,最佳反应温度、时间和酶标二抗最佳反应时间等,建立了替米考星残留的间接竞争酶联免疫吸附试验(ELISA)并应用到牛奶样本的检测.建立的间接竞争ELISA方法半数抑制浓度(IC50)为2.1 ng/mL,牛奶中替米考星的最低检测限(LOD)为2μg/L.在5、10和20 μg/L添加浓度下,回收率为79.2％～90.1％,变异系数不高于9.0％.与其他常见的大环内酯类药物无交叉反应.本研究建立的替米考星间接竞争ELISA方法灵敏度达到了残留限量标准要求,为开发可用于牛奶中替米考星的快速检测试剂盒奠定基础.