利用互补核酸杂交富集金胶实现信号扩增的电化学凝血酶蛋白生物传感器研究

摘要

介绍了一种利用互补核酸杂交富集金胶实现信号扩增的蛋白质生物传感器.以凝血酶蛋白为研究对象,利用凝血酶蛋白相对应的两段核酸适配体,将适配体Ⅰ固定在磁性颗粒上,用于特异性地捕获蛋白,将适配体Ⅱ标记金胶作为检测信标.由凝血酶蛋白和相对应的两段核酸适配体构建三明治结构的凝血酶蛋白生物传感器.另外,再通过信标金胶上过剩的核酸适配体链与另一段标记有金胶的互补核酸进一步杂交,获得金胶的选择性聚集,实现了信号扩增.通过信号扩增,使此传感器的灵敏度大大提高,对凝血酶蛋白的检测下限可达到4.52×10-15 mol/L.平行测定浓度为7.47×10-14 mol/L的凝血酶8次,其RSD为3.0%.该生物传感器对凝血酶蛋白有很好的特异性,其它蛋白如溶菌酶和牛血清白蛋白的存在对于检测没有影响.