UPLC-MS/MS法测定高尿酸血症大鼠血清及尿液中的尿酸和肌酐

摘要

建立了一种测定血清和尿液中尿酸和肌酐含量的超高效液相色谱-串联质谱联用(UPLC-MS/MS)方法.样品经自动进样器引入液相色谱通过预柱富集和去除杂质后,直接引入质谱中进行分析.采用正离子电喷雾电离模式下的多反应监控模式对肌酐进行定量分析,纯溶剂标准曲线的肌酐线性范围为0.03～ 400μmol/L;基质标准曲线的肌酐线性范围为0.2～400 μmol/L;它们的最低定量限分别为0.03和0.2μmol/L.采用负离子电喷雾电离模式下的多反应监控模式对尿酸进行定量分析,纯溶剂标准曲线的尿酸线性范围为0.1～350 μmol/L;基质标准曲线的尿酸线性范围为0.5～ 300 μmol/L;它们的最低定量限分别为0.1和0.5μmol/L.该方法的提取回收率在91.8％～ 103.7％之间,日内和日间RSD分别小于5.9％和6.8％,满足生物分析的要求.利用该方法进行抗痛风中药筛选及其作用机制研究,结果表明,与阳性对照药物别嘌呤醇和苯溴马隆相比,中药二妙丸、黄柏和苍术均能在一定程度上降低血尿酸水平,并可显著逆转肾功能损伤,对肾功能具有一定的保护作用.