miR-200b、miR-200c靶向肝细胞生长因子抑制结直肠癌细胞增殖的机制研究

摘要

cqvip:目的探究微RNA(microRNA,miRNA)——miR-200b、miR-200c及其靶基因表达改变对结直肠癌细胞增殖和患者预后的影响及其调节机制。方法利用生物信息学软件预测miR-200b、miR-200c的潜在靶标,通过荧光素酶报告基因实验验证靶点。用miR-200b和miR-200c模拟物、抑制剂和相应的阴性对照物转染HCT116细胞后用蛋白质印迹法检测肝细胞生长因子(hepatocyte growth factor,HGF)表达水平,使用细胞计数试剂盒(cell counting kit-8,CCK-8)测定细胞的增殖活性。通过Kaplan-Meier生存曲线分析HGF表达水平对结直肠癌患者预后的影响。结果生物信息学软件预测HGF是miR-200b、miR-200c的靶基因,荧光素酶报告基因实验验证miR-200b、miR-200c直接结合HGF 3'非翻译区。细胞高表达miR-200b、miR-200c使HGF蛋白的表达水平降低。CCK-8法证明miR-200b、miR-200c在体外抑制结直肠癌细胞增殖活性。高表达HGF的结直肠癌患者预后较低表达HGF患者差。结论miR-200b、miR-200c可以靶向调节HGF抑制结直肠癌细胞的增殖,可作为结直肠癌患者潜在的治疗靶点。HGF表达水平与结直肠癌患者预后显著相关,其可能成为结直肠癌患者预后的预测指标。