m^(6)A甲基化修饰相关酶基因在牛脂肪生成中的表达分析

摘要

探究参与m^(6)A修饰的相关酶基因包括m^(6)A甲基转移酶METTL3、METTL14、WTAP和m^(6)A去甲基化酶FTO、ALKBH5,在牛不同组织以及前体脂肪细胞增殖和分化过程中的表达水平,为阐明m^(6)A修饰在脂生成中的功能研究提供参考。使用实时荧光定量PCR技术检测基因在新生和成年秦川肉牛不同组织,以及在前体脂肪细胞中的表达;采用CCK-8和油红O染色检测前体脂肪细胞的生长曲线及其成脂分化中的脂滴形成情况。5个基因均在骨骼肌中低表达,其余组织中高表达,而在成年牛脂肪组织的表达水平均显著高于新生牛(P<0.05)。分离的前体脂肪细胞具有良好的生长状态且可正常成脂分化。在牛前体脂肪细胞增殖期,METTL3、METTL14和WTAP的表达在前期下降,之后有所上升但仍维持较低的表达水平。FTO的表达呈缓慢上升趋势。ALKBH5在增殖前期上升,中期下降,在第4天后不断增加(P<0.01)。在前体脂肪细胞分化过程中,METTL3、METTL14和FTO的表达模式基本一致,在分化前期下降,中期高表达,随后降低。而WTAP和ALKBH5的表达随分化进行逐渐增加。结果表明m^(6)A修饰对秦川牛脂肪发育和沉积具有潜在的重要作用,且m^(6)A甲基化酶可能在体外调控牛前体脂肪细胞的脂生成。