人STRA6基因克隆及其在肝癌细胞中的表达定位

摘要

克隆人STRA6基因蛋白编码区,构建STRA6基因真核表达载体并表达于肝癌细胞,分析其在肝癌细胞中的定位。用TRIzol法从人肝细胞QSG-7701中抽提获得总RNA,经RT-PCR和高保真PCR获得人STRA6基因蛋白编码区,并进行测序鉴定;用基因工程技术构建真核表达载体pDsRed1-STRA6,用脂质体法转染人肝癌细胞Hep 3B;蛋白免疫印迹检测肝癌细胞中STRA6蛋白的表达情况,激光共聚焦显微镜分析STRA6在肝癌细胞中的分布。成功克隆人STRA6基因的蛋白编码区,构建真核表达载体pDsRed1-STRA6并使其表达于肝癌细胞中,发现STRA6在肝癌细胞中表达后集中于细胞表面一个区域。本研究成功克隆STRA6基因并证明其在肝癌细胞表面分布具有区域性。