构建OGDH基因敲除型SD大鼠模型

摘要

目的 构建酮戊二酸脱氢酶(OGDH)基因敲除SD大鼠模型.方法 设计、构建TALEN重组子,用荧光素酶活性法筛选出最有效重组子,显微注射法将质粒打入受精卵后测序鉴定.对同一时间点的野生型和基因敲除型大鼠分别进行饮食习惯、活动状态、毛发颜色及质量检测,Western Blot检测两者肝组织OGDH蛋白表达.结果 成功构建了靶向OGDH基因的TALEN质粒,并筛选了最有效的TALEN重组子(OGDH-T2),成功培育出杂合子18只,成功率为22.5％,未发现OGDH-K08纯合子的出生.质量检测显示OGDH-K08大鼠的质量明显高于野生型,且在第10周时最为显著,增幅率达50.2％ (P ＜0.001),KO组大鼠的OGDH蛋白表达水平显著降低,下降率为50.6％(P＜0.01).结论 利用TALEN技术成功构建了OGDH基因敲除型SD大鼠模型.