替莫唑胺诱导人神经母细胞瘤SK-N-SH细胞中MGMT 基因启动子区过甲基化与依立替康敏感性的关系研究

摘要

目的 探讨替莫唑胺对人神经母细胞瘤SK-N-SH 细胞中MGMT 基因启动子区甲基化状态的影响,及该影响与细胞对依立替康敏感性的关系.方法 体外培养神经母细胞瘤SK-N-SH 细胞株作为对照组,采用替莫唑胺处理的细胞株作为实验组,比较两组细胞中MGMT 基因启动子区甲基化状态,Real-time PCR 检测两组细胞中MGMT 基因的表达变化.用MTT 法检测两组细胞对依立替康药物的敏感性.结果 替莫唑胺处理组细胞MGMT 基因的甲基化程度较对照组显著增加.实验组细胞MGMT 基因的表达下调,与对照组比较存在显著差异,两者的表达量差异倍数均值为-3.25±0.71.依立替康对实验组细胞的IC50 为2.5 mg·L-1,对照组的IC50 为5.7 mg·L-1.结论替莫唑胺能够通过增加SK-N-SH 细胞中MGMT 编码基因上游启动子区的甲基化程度,从而下调MGMT 编码基因的表达量,进而增加SK-N-SH 细胞对依立替康的敏感性.