乌头碱对H9c2细胞分化的影响

摘要

目的 观察乌头碱对H9c2细胞分化的影响.方法 用不同浓度的乌头碱作用于大鼠H9c2心肌细胞5 d后噻唑蓝比色法(MTT)检测细胞的增殖率.选取50μM/L的乌头碱作用于全反式维甲酸(RA)诱导分化体系下的大鼠H9c2心肌细胞.光学显微镜观察细胞形态变化,荧光定量PCR(qPCR)检测actc1、myl1、myl2、tnnt2、nppb的mRNA表达,免疫荧光细胞化学染色检测α肌动蛋白(α-actinin)分布情况.蛋白质印迹法(Western Blot)检测α-actinin、心肌肌钙蛋白I(cTnI)蛋白的表达.采用单因素方差分析对比组间差异.结果 乌头碱能够呈剂量依赖性的抑制H9c2心肌细胞增殖(P<0.05).较分化模型组,乌头碱处理组中分化细胞形态减少,actc1[(2.30±0.17)比(0.55±0.03),F=62.17、P=0.000],myl1[(2.57±0.15)比(1.22±0.13),F=63.15、P=0.000],myl2[(18.64±0.53)(10.02±1.10),F=206.65、P=0.000],tnnt2[(5.53±0.23)(2.23±0.10),F=216.89、P=0.000]的mRNA表达降低(P<0.01)差异有统计学意义,cTnI及α-actinin的蛋白表达降低.结论 乌头碱能够抑制H9c2心肌细胞分化.