荒漠植物中总脱氧核糖核酸分子的提取方法

摘要

cqvip:建立了荒漠植物总脱氧核糖核酸分子(DNA)的提取方法.荒漠植物叶片加少量交联聚乙烯吡咯烷酮(PVPP粉末)研磨三次以上,得到样品超细粉末.样品粉末迅速加入前处理缓冲液,混匀后低速离心,弃上清留下沉淀物,在沉淀物中加入等体积预热的提取裂解液,混匀后60~70℃温浴1 h.高速离心提取上清液加入纯化液混匀、抽提、离心.再次提取混合液上清,加入预冷的异丙醇,-18℃沉淀DNA 0.5 h以上,异丙醇溶液高速离心,取沉淀用75%乙醇清洗两遍,晾干,加入超纯水溶解.方法具有操作简单和耗时少等优点,操作过程大约2~3 h. DNA损失少,产量高于500 ng/μL.方法提取主要荒漠植物叶片DNA纯度高、完整性好,具有广泛适用性.