牙鲆Toll样受体1基因全长cDNA的克隆及特征分析(英文)

摘要

[目的]克隆牙鲆TLR1（Tolllikereceptors）全长基因，并对其结构特征和表达规律进行分析。[方法]采用同源克隆和快速扩增cDNA末端技术，从牙鲆头肾组织中克隆出TLRl基因cDNA全长序列，并对该基因进行生物信息学和表达模式分析。[结果]牙鲆TLR1基因cDNA全K2947bp，开放阅读框（ORF）2418bp，编码805个氨基酸，包括26个氨基酸组成的信号肽、2个跨膜区、6个富含亮氨酸重复结构域（LRR）和一个TIR结构域（Toll／interleukin（IL）．1receptor）。该蛋白的分子量为91．15kDa，等电点为6．49。氨基酸序列同源性分析显示，牙鲆TLR1基因与其他脊椎动物的TLRl基因序列全长同源性达到69％～35％，TIR序列的同源性达到84％～62％。在系统发生树上牙鲆的TLR1基因首先与斜带石斑鱼聚类。通过荧光定量qRT—PCR检测，结果显示牙鲆TLR1基因的mRNA主要表达于肝脏、心脏和脾脏等组织。[结论]该研究结果为进一步研究TLR1基因的功能和开发牙鲆免疫增强剂奠定了基础。