组织蛋白酶S对人骨肉瘤细胞增殖、迁移、侵袭的影响及其机制

摘要

目的探讨组织蛋白酶S(Cat S)对人骨肉瘤细胞增殖、迁移和侵袭的影响及其潜在调控机制。方法以正常成骨细胞(hFOB)和人骨肉瘤细胞(SAOS2和MG63)作为研究对象,将Cat S小干扰RNA(si-Cat S)和阴性对照序列(si-NC)转染至SAOS2和MG63细胞中以改变Cat S在人骨肉瘤细胞中的表达。将实验细胞分为4组:hFOB组(hFOB细胞)、Control组(未转染的SAOS2或MG63细胞)、si-NC组(转染了si-NC的SAOS2或MG63细胞)和si-Cat S组(转染了si-Cat S的SAOS2或MG63细胞)。RT-PCR和Western blot法检测Cat S在SAOS2和MG63细胞中的表达;CCK-8和克隆形成实验检测敲低Cat S对SAOS2和MG63细胞增殖活性的影响;划痕和Transwell实验分别检测敲低Cat S对SAOS2和MG63细胞迁移和侵袭能力的影响;Western blot实验检测敲低SAOS2对SAOS2细胞凋亡相关蛋白(Bcl-2、Bax和Caspase-3)和Wnt/β-catenin通路相关蛋白(LRP5、β-catenin、C-myc和Cyclin D1)的影响。结果与hFOB组比较,Cat S在SAOS2组和MG63组中的表达上调(P<0.001)。此外,与si-NC组比较,si-Cat S组细胞的增殖、迁移和侵袭能力均受到抑制(P<0.001)。Western blot结果显示:与si-NC组比较,si-Cat S组细胞的Bcl-2表达下调,而Bax和Caspase-3表达上调(P<0.001)。同时,与si-NC组比较,si-Cat S组LRP5、β-catenin、C-myc和Cyclin D1的表达均下调(P<0.001)。结论siRNA敲低Cat S可以通过调控Wnt/β-catenin通路来抑制人骨肉瘤细胞的增殖、迁移和侵袭并诱导细胞凋亡,预示了Cat S可能是骨肉瘤治疗的潜在靶点之一。