电压依赖性钙通道Cav3.1的cDNA在爪蟾卵母细胞中的表达

摘要

Cav3.1是一种电压依赖性钙离子通道,cDNA 全长7 625 bp.非洲爪蟾卵母细胞有表达外源基因的功能,被用于离子通道异源表达的研究中.pGEM-HE 是卵母细胞的高效表达载体,但由于 pGEM-HE 多克隆位点处的酶切点较少,外源片段常不能直接插入.为了将 Cav3.1的 cDNA 表达于卵母细胞中,首先对 pGEM-HE的多克隆位点和β-Globin 3’端下游的切点进行了改造,引入需要的酶切点,删除了妨碍重组和 mRNA 转录的位点.并将 Car3.1的 cDNA 克隆到改造后的 pGEM-HE 载体中.将重组的质粒在爪蟾卵母细胞中表达,记录到了Cav3.1的通道电流,为以后的工作提供了基础.