利用L-半胱氨酸脱巯基酶拆分DL-半胱氨酸生产D-胱氨酸

摘要

利用L-半胱氨酸脱巯基酶实现DL-半胱氨酸的拆分.将前期构建的含有恶臭假单胞菌TS1138菌株的L-半胱氨酸脱巯基酶基因的基因工程菌E.coli BL21(DE3)-pET21a(+)-CD进行诱导表达,测定其酶活力为126.5 U/g.以该菌体为酶源,考查DL-半胱氨酸拆分条件,确定其最佳pH为9.0,最佳反应温度为45℃,最佳底物浓度6 g/L,最佳菌体浓度为10 g/L,最佳反应时间为1 h.在该条件下拆分DL-半胱氨酸,并将D-半胱氨酸氧化为D-胱氨酸,1 L催化反应体系可获得1.86 g D-胱氨酸,收率为64.6%,经HPLC测定其纯度为98.7%.为D-胱氨酸及D-半胱氨酸提供了一条新的绿色生产途径,具备一定的产业化前景.