以温和噬菌体ρ11为载体克隆α—淀粉酯基因

摘要

温和噬菌体 p11 DNA 和枯草芽孢杆菌(Bacillus subtilis)168染色体 DNA 用 BamH1酶消化和 T4 DNA 连接酶连接,转化到被噬菌体ρ11溶源化了的501菌株中,经过体内交换整入到染色体上,培养48小时后,从1020个菌落中挑出含 Arol^+-Amy^+基因的3个转化子,分别命名为ρ11Amy1、ρ11Amy2和ρ11Amy3。取ρ11Amy1 进行繁殖和丝裂霉素 C 诱导,诱导后的重组噬菌体用于测定噬斑形成能力和转导活性,提取其 DNA 再用于转化,均证明构建成了含淀粉酶基因的重组特异性转导噬菌体。