编码1,3-丙二醇氧化还原酶基因的克隆和表达

摘要

采用PCR法克隆了巴氏梭菌(Clostridium pasteurianum)CpN-86菌株编码1,3-丙二醇氧化还原酶基因(dhaT基因);完成了dhaT基因测序、表达载体构建和在大肠杆菌中表达;分离和纯化了dhaT基因表达的重组蛋白.实验结果:(1)PCR法克隆的dhaT基因和肺炎克雷伯氏菌Klebsiella pneumoniae菌株dhaT基因的序列同源性为82.9%;(2)dhaT基因表达蛋白的酶活为108U/mg;(3)dhaT基因表达的蛋白分子量为43kD;(4)Western blot确定了dhaT基因表达的蛋白和CpN-86菌株天然蛋白有相同的抗原反应.