人热休克蛋白gp96基因的克隆及其在大肠杆菌中的表达与纯化

摘要

热休克蛋白gp96是热休克蛋白90家族成员,能够引起非特异性和特异性免疫反应.得到大量高纯度的蛋白质是研究开发gp96的关键.然而重组的gp96容易在E.coli中降解,并在一定条件下形成多聚体.实验先将人gp96基因克隆到pET-30a载体上并在E.coli Blstar中表达,再经过亲和层析、阴离子交换、分子筛分别纯化gp96.最终去掉了大部分的降解片段和多聚体,得到一定量的可溶性gp96,为进一步研究其结构和功能打下一定的基础.