适冷海洋细菌交替假单胞菌(Pseudoalteromonas sp.)MB-1内切葡聚糖酶基因的克隆和表达

摘要

从黄海深海海底淤泥中筛选出一株产纤维素酶的适冷革兰氏阴性杆菌MB-1,克隆和分析了MB-1的16SrDNA序列(GenBank接受号:AY551321),经鉴定为交替假单胞菌(Pseudoalteromonas),命名为Pseudoalteromonas sp.MB-1.克隆了该菌适冷内切葡聚糖酶基因celA(GenBank接受号:AY551322),并在大肠杆菌(Escherichia coli)BL21中进行了表达.重组E.coli菌体破碎后,获取上清液,其中融合蛋白GST-CelA浓度约为78.5mg/L.分析了融合酶GST-CelA的性质,其最适反应温度为35℃,最适反应pH值为7.2,为中性适冷酶.实验结果为交替假单胞菌低温纤维素酶的基础理论和应用研究奠定了基础.